Новости

Jul 01, 2023

Внедрение нового зонда для захвата и лигирования

Журнал Malaria Journal, том 22, номер статьи: 21 (2023) Цитировать эту статью 1337 Доступов 2 Подробности Altmetric Metrics Массовый скрининг и лечение (MSAT) для элиминации малярии не имеет идеального диагностического средства

Журнал «Малярия», том 22, номер статьи: 21 (2023 г.) Цитировать эту статью

1337 Доступов

2 Альтметрика

Подробности о метриках

Массовый скрининг и лечение (MSAT) для ликвидации малярии не имеет идеального диагностического инструмента, позволяющего провести чувствительное и доступное тестирование целевой группы населения в полевых условиях. В этом исследовании оценивалась возможность использования зондовой ПЦР с захватом и лигированием (CLIP-PCR) в полевом MSAT в Лайза-Сити, Мьянма.

В день 0 у каждого участника было взято по два пятна засохшей крови. В первый день все образцы были проверены на наличие плазмодия в лаборатории площадью 20 м2 с рабочим столом, шкафом биобезопасности, холодильником, настольным встряхивающимся инкубатором и аппаратом для количественной ПЦР четырьмя техническими специалистами с использованием CLIP-ПЦР с объединением образцов в поликлинике г. китайский приграничный город Набанг. На второй день все положительные результаты были проверены и обработаны.

Из 15 038 человек (65% от общей численности населения), прошедших скрининг, 204 (1,36%) оказались положительными по CLIP-PCR. Среди них 188, 14 и 2 были инфицированы Plasmodium vivax, Plasmodium falciparum и P. vivax/P. falciparum смесь соответственно. Пропускная способность тестирования составляла 538 человек в день, стоимость тестирования составляла 0,92 доллара США на человека. Доля субмикроскопической инфекции составила 64,7%. Все положительные люди получили лечение в течение 72 часов после взятия крови.

Использование CLIP-PCR в MSAT в условиях низкой передачи инфекции может поддержать усилия по ликвидации малярии в приграничном регионе Китая и Мьянмы.

Массовый скрининг и лечение (МСАТ) малярии определяется как тестирование всего населения на обширной географической территории с последующим лечением только положительных лиц, независимо от того, есть ли у них симптомы малярии. Такой подход дает важную информацию об эпидемиологии малярии, которая может быть полезна для дальнейших усилий по сдерживанию заболевания [1] и с большей вероятностью будет принята целевой группой населения, чем массовое введение лекарств [2]. Более того, массовое профилактическое лечение примахином для борьбы со вспышками Plasmodium vivax может быть опасным из-за высокого уровня дефицита глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (до 14,8%) среди населения целевого района [3]. Хотя в последнее время стратегия MSAT снова привлекла внимание в контексте ликвидации малярии, Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) не рекомендовала MSAT в качестве стратегии вмешательства для прекращения передачи малярии, поскольку отсутствует высокочувствительный и высокопроизводительный диагностический инструмент. это экономически эффективно и удобно в эксплуатации [2, 4].

Чтобы преодолеть эту проблему, был разработан высокопроизводительный молекулярный анализ на платформе 96-луночного планшета под названием «ПЦР с захватом и лигированием зонда» (CLIP-PCR) [5], позволяющий осуществлять прямое обнаружение РНК малярии без очистки нуклеиновых кислот и обратной транскрипции. с пределом обнаружения 0,01 малярийного паразита/мкл крови или около 0,33 паразита/мкл при использовании сухой капли крови (DBS) диаметром 3 мм [5, 8]. Это соответствует целевому пределу обнаружения, рекомендованному ВОЗ (2 паразита/мкл или ниже) для скрининга малярии на основе ПЦР в условиях низкой передачи инфекции [6], при этом делая скрининг малярии проще и дешевле, чем микроскопия и стандартная вложенная ПЦР [7, 8]. В этом методе мишени 18 S рРНК в образцах крови высвобождаются посредством лизиса клеток и захватываются серией специфических хвостатых зондов в лунки 96-луночного планшета для захвата посредством сэндвич-гибридизации. После удаления дополнительных зондов и примесей связанные хвостовые зонды лигируют с образованием одноцепочечных матриц для последующей амплификации и детекции кПЦР [5]. Недавно была разработана улучшенная версия CLIP-PCR, многосекционная CLIP-PCR (mCLIP-PCR), позволяющая идентифицировать род и вид Plasmodium со значительно сокращенным временем анализа [9].

Особый регион Качин II (KSR2), бедный горный район, расположенный на севере Мьянмы, имеет сухопутную границу протяженностью 214,6 км с уездом Инцзян провинции Юньнань, Китай. После регионального конфликта в КСР2 в 2012 году большое количество внутренне перемещенных лиц иммигрировали и расселились вдоль границы Китая и Мьянмы, что поставило под угрозу достижения совместных мероприятий по трансграничной профилактике и борьбе с малярией между Китаем (провинция Юньнань) и Мьянмой. [10,11,12,13,14]. В КСР2 Мьянмы заболеваемость малярией выросла с 2,1% в 2012 г. до 5,1% в 2016 г. [15]. Кроме того, в 2016 г. в городе Лайза и прилегающих районах наблюдалась вспышка P. vivax [16], где число случаев малярии резко возросло в 2,3 раза с 940 в 2015 г. до 2080 в 2016 г. [16]. Число случаев малярии, завезенных из Мьянмы в округ Инцзян, быстро возросло с 35 в 2012 году [17] до 185 в 2016 году [16], что поставило под угрозу цель ликвидации малярии в округе Инцзян к 2020 году [18,19,20].